| 目的：通过研究人角膜上皮细胞系和角膜成纤维细胞在灭活的茄病镰刀菌菌丝刺激后Toll样受体(toll-like receptors，TLRs)的表达和功能变化，探讨角膜上皮及其表达的TLRs在角膜真菌感染中的作用
方法：茄病镰刀菌的灭活菌丝片断按照1:1比例来刺激培养的角膜上皮细胞系和角膜成纤维细胞，细胞的TLR1-10 mRNA表达用Real-time PCR分析，ELISA检测培养液中的细胞因子IL-6，8；然后氢化可的松被用来和灭活菌丝一起来刺激培养的细胞，再次分析TLR1-10 mRNA的表达和IL-6，8释放； TLR2，4蛋白水平表达的变化用荧光免疫组织化学和western blot进行检查。另外用TLR2，4的单克隆抗体来阻断TLR2，4观察菌丝对IL-6，8释放的影响。
结果：茄病镰刀菌的灭活菌丝能增加上皮细胞TLR2, 3, 4, 6 mRNAs的表达和IL-6，8的释放，氢化可的松能轻度增加角膜上皮细胞TLR2 和TLR4的表达和IL-6的释放。灭活菌丝也能增加成纤维细胞的TLRs mRNA表达和上调HCF IL-6，8的释放，而氢化可的松能抑制灭活菌丝诱导的TLRs mRNA的表达和IL-6，8的释放。荧光免疫组织化学和western blot结果显示灭活菌丝片断能促进TLR2 和TLR4蛋白水平的表达，而且这种表达能进一步被氢化可的松上调。预先用anti-TLR2或anti-TLR4抗体封闭HCF后这两种抗体发现能显著抑制IL-6和IL-8的释放，但是对照的同型的IgG却没有抑制作用，联合使用两种抗体能达到最大的抑制效果。
结论：角膜上皮细胞除自身的屏障作用外，其表达的TLRs与角膜抵御真菌的天然免疫密切相关；角膜上皮和角膜成纤维细胞表达的TLR2，4可能在角膜防御真菌感染的过程中发挥重要作用；糖皮质激素可能增加角膜上皮TLRs表达而使角膜对真菌的侵袭力具有防御作用 |
