摘要 目的 探讨体外分离培养高纯度、高活力大鼠骨髓间充质干细胞(MMSCs)的方法,为眼科组织工程提供种子细胞。设计 实验研究。研究对象 大鼠MMSCs。方法 采用MTT法检测MMSCs活性,流式细胞术检测MMSCs纯度。对比改良贴壁筛选法与密度梯度离心法,剪去干骺端法与骨干中间剪断法,不同月龄对大鼠MMSCs活性和纯度的差别。主要指标 细胞数量,细胞活性和细胞纯度(CD44+CD34-,CD90+CD34-)。 结果 改良贴壁筛选法比密度梯度离心法获取的MMSCs细胞数量多,细胞纯度差异无明显统计学意义。剪去干骺端法比骨干中间剪断法获取的MMSCs细胞数量少,细胞纯度差异无明显统计学意义。在相同接种密度条件下,MMSCs的增殖活力随大鼠年龄的增长而下降。结论 改良贴壁筛选法是一种简便易行的培养高活力、高纯度MMSCs的方法,可以作为培养大鼠MMSCs的常规方法。取材大鼠年龄以2月左右为宜。
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