目的 检测内质网应激标志物葡萄糖调节蛋白78(grp78)在大鼠视网膜缺血再灌注后不同时期的表达情况,探讨内质网应激反应在视网膜缺血再灌注损伤中的作用及机制。方法36只Wistar大鼠随机分为6组:视网膜缺血再灌注后6h、12h、24h,48h和72h组,以及正常对照组,每组6只大鼠,采用大鼠单眼生理盐水前房高压灌注(110 mmHg×60 min)的方法建立视网膜缺血再灌注模型,在不同时段分批处死大鼠,摘除眼球,用免疫组织化学的方法检测视网膜组织中grp78蛋白的表达水平,半定量RT-PCR方法检测grp78 mRNA的表达。结果 免疫组化结果表明Grp78在正常大鼠视网膜中少量表达,主要分布于视网膜内核层和神经节细胞层,在缺血再灌注后12h表达量明显升高(与对照组相比,p<0.01),表达高峰出现在再灌注后24h(与正常对照组相比,p<0.01;与12h组相比,p<0.01),再灌注48h 表达开始下降(与24h相比,p<0.01),但仍强于正常对照组(p<0.01);RT-PCR检测结果:缺血再灌注后6h开始grp78 mRNA的表达迅速上升(与对照组相比,p<0.01),并随再灌注的时间延长而表达增加,到24h达到高峰,72h表达下降至对照组水平。结论 内质网应激反应参与了大鼠视网膜缺血再灌注损伤机制,若能在损伤早期内质网应激环节上加以干预,可为临床治疗和干预提供理论依据。 |