| 目的：分离鉴定首先被氨甲酰化攻击的晶状体蛋白质。方法：6只透明新鲜的晶状体取自2周岁健康牛。取其中4只晶状体与100 mM 氰酸钾于37℃水孵箱振动温育7天。其余2只晶状体设为正常对照组。所有晶状体孵育在50 mM DMEM 液中，然后每只晶状体去囊膜，匀浆，提取水溶性蛋白质。采用双向凝胶电泳进行蛋白质分离。对比分析氨甲酰化组和正常对照组蛋白质表达的差异。切取凝胶上的蛋白质斑点，进行基质辅助激光解析电离飞行时间质谱分析(MALDI-TOF-MS)。经质谱分析所得到的多肽峰值经SWISS-PROT数据库查询，以确定早期被氨甲酰化攻击的晶状体蛋白质。结果：双向凝胶电泳结果显示大部分蛋白质斑点集中在pI 5-8，相对分子量20-35 kDa。氨甲酰化修饰后电泳图上斑点明显增多，呈串珠样改变，向阳极端迁移。质谱分析结果表明被氨甲酰化修饰的基团发生在αA-, βB2-和 βS- (γS-) 晶状体蛋白质。
结论：双向凝胶电泳和质谱分析技术可以较好地应用在首先被氨甲酰化攻击的牛晶状体蛋白质的分离和鉴定实验中。通过质谱分析首次证实了容易被氨甲酰化攻击的αA-, βB2-和 βS- (γS-) 这三种晶状体蛋白质和赖氨酸结合位点，为我们进一步预防和治疗白内障的研究提供了新思路。
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