目的:探讨Shotgun方法用于分析泪液蛋白质组,比较结膜松弛症和正常人泪液中蛋白质成分的差异,从而发现结膜松弛症的发病机理。
方法:收集结膜松弛症患者和正常对照组各10例,采用毛细管从每只眼收集15μl泪液,将结膜松弛症患者和正常人的泪液样品等体积混合后用shotgun方法检测泪液蛋白质,分别行溶液内酶解,进行反向高效液相色谱(RP-HPLC)分离,电喷雾离子化质谱(ESI-MS/MS)行质谱鉴定。
结果:正常人泪液中蛋白质共有352个,其中有分子功能的蛋白为141个,结膜松弛症患者泪液中蛋白质共有356个,其中有分子功能的有154个,主要涉及功能与对照组相似,但出现某些特异性蛋白质的表达及发现有缺失蛋白质。
结论:Shotgun方法可有效分离和分析泪液蛋白质,为分析结膜松弛症泪液中蛋白质的成分改变提供了新的方法和途径,结膜松弛症泪液中特异性蛋白质的表达及某些缺失蛋白质可能是结膜松弛症发病的关键。
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