| 目 的
探讨地塞米松(Dex)对体外培养正常人及POAG患者人眼小梁细胞紧密连接蛋白ZO-1和间隙连接蛋白Cx43表达的变化及Actin骨架形态结构的影响，初步证实其在小梁网房水流出阻力调节中的作用。
方 法
将体外培养的正常人眼小梁细胞（NTM）、POAG患者小梁细胞（GTM）及永生化正常人眼小梁细胞株（iHTM，加拿大Vincent Raymond教授惠赠）分为对照组和处理组，分别用空白Dex和0.1μM Dex DMEM/F12完全培养液进行培养1－7天，应用免疫荧光细胞化学，RT-PCR、Western blot方法分别从mRNA水平和蛋白水平检测小梁细胞ZO-1、Cx43的表达改变；同时分别用空白Dex和0.5μM Dex DMEM/F12完全培养液进行培养1周，应用免疫荧光细胞化学检测小梁细胞Actin骨架形态的改变。
结 果
① Dex处理2天后，人眼小梁细胞ZO-1、Cx43蛋白分布无明显变化，均定位于相邻细胞边界。
② 各组小梁细胞在mRNA水平均有ZO-1、Cx43的表达，其中ZO-1存在两种亚型α+ /α-, ZO-1α+比α-表达量少。
③ 各组小梁细胞在蛋白水平均有ZO-1、Cx43表达，其中正常人眼小梁细胞只检测到ZO-1一种亚型α-表达而POAG患者小梁细胞检测到ZO-1两种亚型α+ /α-。
Dex处理1－7天，各组细胞两种蛋白的表达均呈先上升后下降的趋势，并且两种蛋白表达趋势变化基本一致。对于正常人眼小梁细胞，Dex处理5天前，相同时间点Dex处理组两种蛋白的表达量明显较对照组高；Dex处理5天后，相同时间点Dex处理组两种蛋白的表达量明显较对照组明显减少。对于POAG患者小梁细胞Dex处理1－7天，相同时间点地塞米松处理组ZO-1a+ 和Cx43蛋白的表达量明显较对照组高。
④ NTM细胞的DEX处理组可见CLANs结构形成而对照组未见此结构存在；GTM和iHTM细胞对照组可见CLANs结构，而DEX处理组CLANs结构形成明显增多。
结 论
① 体外培养正常人和POAG患者小梁细胞存在紧密连接相关蛋白ZO-1和间隙连接蛋白Cx43的表达,ZO-1存在两种亚型ZO-1α+与ZO-1α-,其中ZO-1α+在GTM的表达可能与POAG患者小梁网部位房水流出阻力增加有关。
② Dex可以诱导体外培养人眼小梁细胞Actin骨架重构形成CLANs结构，DEX可以改变紧密连接相关蛋白ZO-1和间隙连接蛋白Cx43的表达，可能在小梁网部位房水流出阻力调节中具有重要作用。
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