| [摘要] 目的 检测圆锥角膜基质细胞内端粒长度的变化以及圆锥角膜基质内衰老相关-β-半乳糖苷酶（SA-beta-galactosidase）和衰老标记蛋白-30（senescence marker protein-30, SMP-30）的表达，以探讨这些分子标志物在圆锥角膜发生发展中的临床意义。方法 采用Southern Blot法检测圆锥角膜和正常角膜基质细胞的端粒长度。以X-gal组织染色法染色圆锥角膜和正常角膜基质中的β-半乳糖苷酶，应用RT-PCR分别检测圆锥角膜和正常角膜基质中的衰老标记蛋白-30。同时对圆锥角膜和正常角膜基质进行组织病理学观察。结果 圆锥角膜基质细胞的端粒长度为10.29～14.12kb，平均端粒长度为11.54±1.41 kb；正常角膜基质细胞的端粒长度为12.64～15.32 kb，平均端粒长度为13.45±0.99 kb；统计学分析显示两者差异明显（P<0.05）。组织化学染色揭示圆锥角膜基质内X-gal染色可见散在分布蓝色阳性着色，表明存在衰老相关-β-半乳糖苷酶的表达；而正常角膜基质中X-gal染色阴性，未见衰老相关-β-半乳糖苷酶表达。RT-PCR检测结果发现圆锥角膜及正常角膜中均无SMP-30蛋白的表达。组织学观察显示正常角膜基质纤维排列规则紧密，角膜细胞规则地分布在基质中。而圆锥角膜基质胶原纤维排列呈现疏松不规则，细胞分布较前者散乱且数量减少。结论 与正常角膜基质相比，圆锥角膜基质细胞的端粒长度有所缩短，基质中β-半乳糖苷酶表达增加，提示圆锥角膜可能是一种与组织异常老化有关的疾病，这为揭示圆锥角膜的发病机制提供了新的理论和证据。 |
