目的:探讨兔角膜基质细胞在羊膜上及低血清或无血清培养基上培养时,保持角膜基质细胞原有表型及细胞特异性蛋白的表达。
方法:将兔角膜基质细胞分别种植于羊膜及塑料培养板上,分别加入不同血清浓度的培养基培养,细胞在不同条件下原代生长后分别观察细胞形态的变化,检测角膜基质细胞特异性蛋白keratocan的mRNA表达的情况,比较表达的特异蛋白keratocan的mRNA的差别;80%的细胞融合后进行传代培养。比较不同的培养条件下角膜基质细胞的形态差别。分别检测传代后在不同的培养条件下角膜基质细胞特异性蛋白keratocan的mRNA表达的情况及免疫组化检测角膜基质细胞中间丝蛋白。
结果:羊膜上培养的细胞无论原代或是传代的细胞,在不同的血清浓度中均表达角膜基质细胞特异性蛋白keratocan的mRNA。在塑料培养板上利用含有10%胎牛血清的培养基培养时,仅原代培养时表达角膜基质细胞特异性蛋白keratocan的mRNA,传代的细胞基本不表达;在低血清或无血清培养基条件下,原代与传代的细胞中均有keratocan的mRNA表达。
结论:角膜基质细胞在羊膜上及低血清或无血清培养基中培养可以保持细胞的原有特性。
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