目的:研究小鼠和人骨髓间充质细胞(BMSC)中眼组织相关基因的表达情况,为从骨髓间充质细胞中分离纯化“眼源性干细胞”奠定基础。
方法:正常Balb/c小鼠和胎儿骨髓均取自股骨,按常规方法原代培养BMSC。待细胞生长至80%融合后,按2×105cells/ml密度传代接种于细胞培养瓶中,以L-G DMEM,10%FBS(Gibco)培养液培养获得传代BMSC细胞。通过抽提总RNA、反转录PCR对BMSC眼组织和细胞相关标志基因Rhodopsin、RPE65、CRALBP、PAX6等的表达情况进行研究。
结果:RT-PCR结果显示,体内直接取出的小鼠骨髓组织和传代培养的骨髓间充质细胞都可以检测到Pax6、Rhodopsin、RPE65、CRALBP等眼组织相关基因的表达。在体内直接取出的人骨髓组织和传代培养的骨髓间充质细胞表达Pax6、CRALBP、PEDF、Sox2、Prox1,但未检测到Rhodopsin、RPE65的表达。
结论:直接取自小鼠和人骨髓的间充质细胞表达眼组织相关基因,说明骨髓中可能存在有定向的“眼源性干细胞”,在一定条件下可能进一步分化为眼部功能细胞参与其修复过程。
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