目的:研究牛眼视网膜提取物(BRE)对小鼠骨髓间充质细胞(BMSC)增殖和分化的作用。
方法:体外培养来自Balb/c小鼠的BMSC,实验组添加10μg/ml BRE蛋白。光镜观察BRE对小鼠BMSC形态的影响,MTT法检测BRE对BMSC增殖的作用。扫描电镜检测超微结构的变化。RT-PCR检测BRE对BMSC细胞 Rhodopsin、RPE65、CRALBP等视网膜色素上皮相关基因表达的影响。
结果:与对照组相比,添加BRE后的BMSC细胞生长更为有序;MTT法检测结果显示BRE可以促进小鼠BMSC的增殖。采用添加有BRE的高钙MEM培养BMSC,传至第18代时发现细胞呈现规则的多边形上皮形态。扫描电镜观察发现细胞表面有大量微绒毛。RT-PCR结果表明,与未处理的BMSC细胞相比,经BRE处理的BMSC细胞RPE65的表达量减少、CRALBP的基因表达消失,Rhodopsin的表达量基本不变。
结论:BRE对Balb/c小鼠BMSC具有明显的促增殖作用,并能促进其向上皮样形态的转变,但这些细胞视网膜色素上皮相关基因的表达并未上调,说明单独BPE并不能有效的促进BMSC向RPE方向的分化。
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