| 目的 1、探讨以壳聚糖为主要材料构成的组织工程角膜支架的生物相容性；2、培养保持正常表型的三种角膜细胞；3、试用壳聚糖支架材料构建组织工程角膜基质。
方法：
（一） 以壳聚糖为主要材料构建的组织工程角膜支架的生物相容性比较和筛选。40只新西兰大白兔平均分为5组，原花青素和戊二醛交联剂构建的四种支架分别进行兔角膜囊内移植实验，以检测材料的生物相容性，并进行性质各种检测。
（二） 培养保持正常表型的三种兔角膜细胞。在羊膜上培养上皮细胞；在羊膜上和低血清或无血清培养基培养角膜基质细胞；后弹力层贴膜法培养内皮细胞。
（三） 培养的三种角膜细胞分别与筛选出的原花青素交联的壳聚糖支架共培养，尝试构建组织工程角膜基质。
结果：
（一）壳聚糖为主要材料合成的组织工程角膜支架筛选出原花青素交联的支架刺激性小。
（二）培养在羊膜上的上皮细胞保持正常表型；在羊膜上和低血清或无血清培养基中角膜基质细胞形态正常，表达特异性的kerotocan蛋白；内皮细胞生长良好。
（三）角膜细胞与筛选出的支架共培养：上皮细胞和基质细胞可在支架上生长，内皮较难生长。行板层移植2周后合成膜全部脱落。
结论：
1、原花青素可能比戊二醛更适合作为组织工程角膜支架材料的交联剂。
2、建立了长期保持三种角膜细胞正常特性的培养方法。
3、壳聚糖支架分别与角膜上皮细胞和基质细胞共培养可以获得初步的组织工程角膜基质。
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