目的 研究视网膜变性RCS大鼠病变发展过程中含melanopsin在视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells, RGCs)上表达和分布的变化。
方法 1、取出生后21天(P21d)、P60d 和P90d RCS视网膜变性大鼠和正常对照大鼠,取视网膜行铺片和冰冻切片anti-melanopsin免疫组化染色;
2、取出生后21天(P21d)、P60d 和P90d RCS视网膜变性大鼠和正常对照大鼠,取视网膜行western-blot,检测不同病变阶段正常和视网膜变性RCS大鼠视网膜melanopsin蛋白的表达改变。
结果 1、在正常RCS大鼠视网膜约2%神经节细胞呈melanopsin阳性表达,分布于全视网膜,melanopsin除了表达在神经节细胞的胞体,在突起(轴突)上也有表达;
2、正常大鼠视网膜神经节细胞melanopsin的表达随发育无显著变化,变性早期(P21d)视网膜变性大鼠同正常大鼠相比无明显差异,变性晚期(P60d、P90d)视网膜变性大鼠melanopsin阳性神经节细胞所占比例较正常大鼠高;
3、大鼠视网膜melanopsin蛋白分析显示蛋白表达非常微弱,在正常大鼠和视网膜变性大鼠可见分子量约60kd的蛋白条带,在生后发育和变性不同阶段蛋白量无显著改变。
结论 melanopsin不仅表达在神经节细胞的胞体,在突起(轴突)上也有表达,与以往文献报道有差异。视网膜变性RCS大鼠病变发展晚期视网膜神经节细胞总量减少,而含melanopsin的神经节细胞所占比例反而略有增高,蛋白分析melanopsin表达量无显著改变,提示mRGCs较普通RGCs对视网膜变性微环境具有更强的耐受力。
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