| 目的 观察NeurobasalTM Media神经基质培养基对RGC细胞的培养情况，检测LEDGFp52基因和蛋白在RGC的表达情况。
方法 取材自出生0-2d的新生Long Evans大鼠视网膜，10%多聚赖氨酸包被24孔培养板底及盖玻片，制备NeurobasalTM Media 无血清培养体系，5％CO2孵箱内培养RGC。MAP2和Thy1.1免疫双标鉴定RGC纯度，每日观察RGC生长状况。收集培养三天的RGC，Tripure试剂提取总RNA，RT-PCR检测LEDGFp52基因在RGC的表达；细胞爬片固定后，MAP2和LEDGFp52抗体双标，在相差倒置显微镜下利用荧光视野观察LEDGFp52蛋白在RGC的表达。
结果 在无血清培养条件下，9.7ML NeurobasalTM Media＋0.2ML B27 Supplement＋0.1ML0.5mM L-glutamine的体系对RGCs的培养，细胞数量多，具有多个突起和轴突，符合RGCs的形态学特征，MAP2和Thy1.1免疫双标鉴定RGC纯度高达96％。经RT-PCR扩增后得到200bp的LEDGFp52基因产物，在Leica Flue和 Leica QWin 模式分别观察， LEDGFp52标记的RGCs呈现绿色荧光和相差视野下明场中RGCs的形态基本一致。
结论 无血清的NEUROBASALTM Media培养基培养RGCs是较好的一种培养体系，首次确立了 LEDGF p52基因及其蛋白在RGCs的表达。
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