目的 观察培养的人视网膜色素上皮细胞 (human retinal pigment epithelial cells, hRPE) 在机械牵拉力的作用下单核细胞趋化蛋白-1 (monocyte chemoattractant protein-1, MCP-1) 和白介素-8 (interleukin-8, IL-8) 的合成与分泌,以模拟和了解这两种炎性因子可能在原发性视网膜脱离形成早期的作用。方法 将胶原包被的磁珠悬液加入培养的hRPE细胞,孵育并洗去未结合的磁珠。用免疫荧光双标染色和酶联免疫反应 (ELISA)分别测定hRPE细胞在磁场垂直方向力作用下0h、15 min、0.5h、1h、4 h、和8 h时,以及在细胞松弛素D处理后,各时间点的MCP-1和IL-8的荧光亮度和培养液上清中的蛋白水平。结果 不受磁场作用的hRPE表达极低的MCP-1及IL-8。在牵拉力作用下,MCP-1及IL-8的表达有两个峰值,MCP-1和IL-8的荧光亮度第一个峰值出现在0.5h以内,分别达到49.54 ± 3.05和57.01 ± 6.29,蛋白分泌水平的第一个峰值出现在1h以内,分别为552.049 ± 7.643和236.673 ± 14.299。第二个峰值出现在4 h左右。细胞松弛素D预处理后两种因子的荧光亮度和分泌量均明显降低,分别为17.21 ± 4.17和15.33 ± 2.54,以及121.362 ± 6.020和101.863 ± 15.925。而没有包被磁珠组两种因子无明显变化。结论 机械牵拉力可诱导hRPE细胞表达MCP-1和IL-8,这种作用在细胞松弛素预处理后出现部分抑制,提示其影响由细胞骨架的参与,这两种炎性因子在视网膜脱离发生的起始阶段起到一定作用。
|