目的:观察电场作用后人视网膜色素上皮(human retinal pigment epithelial, hRPE)细胞整合素Integrinβ1表达的变化,并探讨其相关机制。
方法:培养于DMEM+10%FBS的hRPE细胞暴露于强度为8V/cm的直流电场中,未接受电场作用的细胞作为正常对照。分别于0min、30min、60min及90min采用细胞免疫荧光法检测细胞内Integrinβ1的表达情况;收集相应时间点细胞,采用Western blotting检测局部粘着斑激酶(FAK)表达及活化情况。
结果:未接受电场作用的hRPE细胞中,可见绿色荧光标记的Integrinβ1均匀分布于细胞膜,荧光亮度较弱。暴露于电场后,细胞膜荧光朝向阴极一侧的亮度逐渐增强,阳极侧减弱,此趋势随电场作用时间的延长而更为明显。电场作用后hRPE细胞FAK蛋白表达量逐渐增加,其磷酸化型同样呈上升趋势,分别与对照组相比有显著性差异(P<0.05);FAK表达量的变化与电场作用时间呈正相关(r=0.814)。
结论:电场对hRPE细胞的作用可诱导Integrinβ1的定向表达,该过程与FAK介导的信号传导通路激活有关。本研究为揭示电场对hRPE细胞作用的机制提供新的实验依据。
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