| 目的：观察糖尿病大鼠视网膜血管mtDNA氧化损伤及粘附分子表达、细胞凋亡产生，阐明糖尿病视网膜病变(DR)发病中血管mtDNA氧化损伤的存在及其与细胞功能障碍的关系。方法：应用链尿佐菌素（STZ）诱导糖尿病大鼠模型，以造模成功后1月、2月、3月大鼠为DR1m 组、DR2m 组、DR3m 组，各时间点设年龄相匹配的正常大鼠为对照，即NR1m 组、NR2m 组、NR3m 组。提取各组大鼠视网膜血管DNA 后，联合Fpg 酶切Southern blot 定量检测未损伤mtDNA 含量；RNA行RT-PCR 观察mtDNA 编码基因COX1 及转录调控基因mtTFA mRNA 的表达；消化铺片后TUNNEL 免疫荧光、ICAM-1 免疫组化染色，观察细胞凋亡及粘附分子的表达。结果：DR1m、DR2m、DR3m 组大鼠分别与NR1m、NR2m、NR3m 组大鼠相比，未损伤mtDNA 含量明显减少，且随着时间的延长，减少更明显；线粒体DNA编码基因 COX1及转录调控基因mtTFA mRNA 表达降低，随病变时程延长下降明显；TUNNEL(除DR1m 组外)、ICAM-1 阳性细胞数增多，且着染更深。结论：糖尿病大鼠随着病程延长，视网膜血管病变产生，mtDNA 损伤加重，其编码基因及转录调控基因mRNA 的表达均相应下降，同时粘附分子表达上调、细胞凋亡逐渐出现。在糖尿病视网膜病变发生发展中，mtDNA 损伤存在且逐渐加重，与细胞粘附分子表达、细胞凋亡产生等功能障碍存在明显时间相关性，可能是导致血管功能障碍的原因之一。
|
