目的:视网膜色素上皮细胞(RPE)移植于网膜下腔为视网膜变性疾病提供了一种乐观的治疗方案,然而异体RPE可引起免疫排斥反应,自体RPE细胞又存在获取困难、损伤大的缺点。本研究通过比较体外培养的RPE细胞与虹膜色素上皮细胞(IPE)的异同,探讨应用IPE细胞替代RPE细胞进行视网膜色素上皮性疾病治疗的可行性。方法:(一)将从同一眼获取的RPE及IPE细胞在同等条件下培养于加有30%胎牛血清、50-mg/ml庆大霉素、2-mmol/L谷氨酰胺的Ham F12营养液中,并进行传代培养,通过扫描电镜及免疫组织染色观察细胞形态学及生长状态方面的差异。(二)冻存细胞,并比较其在冻存前后的差异。结果:(一)RPE细胞及IPE细胞在体外培养中有极大的相似性。它们在Ham F12培养液中皆良好生长,二者的形态近似,细胞约3-5日贴壁,5-7日后开始增长,约15-18日融合;二者在体外可生长数月,传代近20代以上;随生长增殖,细胞皆出现色素颗粒的脱失;唯IPE细胞的生长略慢于RPE细胞。经扫描电镜显示,RPE细胞及IPE细胞皆表现出良好的极性,且顶端都生有微绒毛。免疫酶标染色显示,所培养细胞为纯IPE及RPE细胞。(二)冻存前后,IPE细胞及RPE细胞的形态及生长特性皆未见明显差别。结论:体外同等条件下对IPE细胞及RPE细胞的培养显示,IPE细胞在形态及生长特性上与RPE有许多共同点,且可冷冻保存,可作为RPE的替代材料。 |