| 目的 筛选并鉴定大鼠晶状体中泛素的靶蛋白。材料与方法 DEAE离子交换层析制备FractionⅡ；过量牛泛素孵育晶状体组织蛋白；GST-S5a亲和层析获取泛素化蛋白；晶状体泛素化蛋白的不连续SDS-PAGE；选取蛋白条带并将其从胶上切下；凝胶内酶解；基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS）分析得到肽质量指纹谱；数据库检索，鉴定泛素靶蛋白。结果 凝胶上选取6个蛋白条带，共鉴定出了四个蛋白和一个蛋白混合物。它们是胞影蛋白α链、αA晶体蛋白、βB2晶体蛋白和αB晶体蛋白。蛋白混合物为谷胱甘肽S转移酶和26S蛋白酶体S5a亚基。结论 胞影蛋白、αA晶体蛋白、βB2晶体蛋白和αB晶体蛋白是大鼠晶状体中泛素的靶蛋白，它们可通过泛素蛋白酶体途径降解。 |
