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银杏叶提取物对视网膜神经节细胞保护作用的研究
作者:王云松  …  文章来源:北京同仁眼科中心 100730  点击数1426  更新时间:2004/5/31  文章录入:毛进  责任编辑:毛进
目的:建立用荧光金逆行上丘标记鉴定体外培养的视网膜神经节细胞的方法;研究银杏叶提取物对视网膜神经节细胞的保护作用。 方法:一、将生后20天的SD大鼠用3%荧光金行双侧上丘注射,逆行标记视网膜神经节细胞。6天后摘除眼球,分为两组,一组行视网膜铺片,荧光显微镜下观察标记情况。另一组摘除眼球后分离视网膜,用酶消化分离法制成细胞悬液,于倒置荧光显微镜下观察荧光着染的视网膜神经节细胞的形态,摄像。二、将生后26天的SD大鼠摘除眼球后分离视网膜,用酶消化法制成细胞悬液,分别加入不同浓度的银杏叶提取物,用台盼兰染料排斥法检测视网膜神经节细胞的存活情况,于不同时间点用血细胞计数板计数。 结果:逆行上丘标记观察到即兴分离的视网膜悬液中,视网膜神经节细胞被荧光金标记为亮黄色,其中体积较大的节细胞壁薄,折光性弱,离体后死亡较快,死亡后荧光消失。用台盼兰染料排斥法观察到在视网膜细胞悬液中,这种大节细胞死亡迅速,死亡后被染成蓝色,而其它类型的细胞则能在细胞悬液中存活较久。加入银杏叶提取物后大节细胞存活时间明显延长,于不同时间点3小时、1天、3天、5天、7天,与对照组比较节细胞存活率均有显著性差异,且呈明显剂量依赖。 结论:用荧光金逆行上丘标记鉴定体外培养的视网膜神经节细胞方法可行;银杏叶提取物对体外培养的视网膜神经节细胞具有明显的保护作用。
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