纳米微载体介导siRNA调控恒河猴Tenon’s 囊成纤维细胞增殖的研究
葛坚 叶荷花 段永恒 黄圣松 邵婷婷 孙雪荣 江儒章
眼科学国家重点实验室 广州 510060
目的:探讨纳米微载体介导siRNA对恒河猴Tenon’s囊成纤维细胞增殖的抑制作用。方法:流式细胞仪测量纳米微载体CS-g-(PEI600-g-PEG)和CS-g-(PEI1800-g-PEG)在猴Tenon’s囊成纤维细胞中siRNA的转染效率。四甲基偶氮唑盐法测载体的细胞毒性。靶向IKKB基因的siRNA结合微载体转染猴Tenon’s囊成纤维细胞,以逆转录聚合酶链反应测IKKB mRNA表达水平,免疫印迹法测蛋白表达水平。结果:CS-g-(PEI600-g-PEG)、CS-g-(PEI1800-g-PEG)及无载体siRNA转染效率分别为82.7%、69.4%和4.5%。载体浓度≤0.01g/L时无明显细胞毒性。经转染结合CS-g-(PEI600-g-PEG)的靶向IKKB的siRNA,成纤维细胞IKKB的mRNA和蛋白表达均受抑制。结论:纳米微载体siRNA转染率高,其介导抗IKKB的RNA干扰技术可能是抑制抗青光眼术后滤过道瘢痕化的新手段。
本课题基金:国家自然科学基金(3035555)、卫生部临床重点学科项目(2004468)、教育部高等学校博士学科点专项科研基金(20060558035)
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