摘要
目的:了解PAX6基因沉默对HLE-B3细胞的影响
材料:慢病毒载体系统,HLE-B3,ANTI-PAX6
方法:寻找4个PAX6候选干扰靶点,并构建4个PAX6干扰慢病毒载体及一个阴性对照病毒载体,内源筛选有效的PAX6干扰慢病毒,western blot验证,realtime实时定量分析,应用有效的PAX6干扰慢病毒感染HLE-B3细胞,观察B3细胞变化。
结果:构建的4个PAX6干扰慢病毒中,三个是有效的,即找到3个有效PAX6干扰靶点。用有效的PAX6干扰慢病毒感染HLE-B3细胞使PAX6基因沉默,随时间延长,HLE-B3细胞数目逐渐减少,流失细胞仪检测HLE-B3细胞凋亡增加。
结论:PAX6基因沉默导致HLE-B3细胞凋亡。
|