目的 研究人视网膜干细胞移植对视网膜缺血再灌注损伤大鼠视网膜各层细胞数量和厚度以及凋亡细胞数量变化的影响,探讨视网膜干细胞移植在视网膜缺血再灌注损伤修复中的作用。方法 无血清细胞培养方法培养人视网膜干细胞,磷酸钙介导的转染法将EGFP DNA导入人视网膜干细胞,大鼠前房灌注生理盐水制成高眼压视网膜缺血再灌注损伤模型,视网膜缺血再灌注损伤大鼠视网膜下腔移植转染EGFP人视网膜干细胞。分别于视网膜损伤及细胞移植后1天、7天、14天、28天行冰冻切片, HE染色观察视网膜细胞数量和各层厚度,原位细胞凋亡TUNEL检测方法行细胞凋亡检测。结果 视网膜缺血再灌注损伤1天,视网膜细胞和组织广泛性水肿,视网膜厚度增加,7天、14天和28天视网膜各层厚度下降,以内丛状层下降更为显著,视网膜各层细胞数减少,以节细胞数减少最为显著;视网膜缺血再灌注损伤后14天、28天,节细胞层存在少量凋亡细胞。人视网膜干细胞移植后1天、7天、14天和28天,视网膜细胞数量和各层厚度与对照眼无明显差别;细胞移植后1天,在节细胞层、内颗粒层存在凋亡细胞,7天、14天和28天,视网膜中未检测到凋亡细胞。结论 人视网膜干细胞移植于高眼压视网膜缺血再灌注损伤大鼠视网膜下腔,能够通过减轻视网膜水肿,维持视网膜各层厚度,减少凋亡细胞数量而对缺血损伤视网膜起到一定修复作用。关键词 视网膜干细胞;缺血再灌注;细胞移植;视网膜修复
|