| 摘要 目的 RNA干扰(RNA interference RNAi)技术沉默结缔组织生长因子（connective tissue growth factor,CTGF）基因表达对牛角膜内皮细胞增殖的影响。方法 设计并合成CTGF特异性SiRNA( small interfering RNA),用脂质体转染入培养的牛角膜内皮细胞，反转录聚合酶链反应（RT-PCR）法观察基因沉默效果，免疫印迹（Western blot）法观察1.00μg/L TGF-β2作用下角膜内皮细胞内P27蛋白表达。结果 CTGF SiRNA成功转染入培养的牛角膜内皮细胞并有效沉默CTGF mRNA表达,转染24h，48h和72hCTGF mRNA表达分别为正常对照组的17.3%，24.4%和41.7%，与正常对照组比较，其差异有统计学意义（p≤0.05）。在转染36h时P27蛋白表达明显下降（p≤0.05）。结论 CTGF特异性SiRNA能有效沉默细胞内CTGF mRNA表达通过下调角膜内皮细胞P27蛋白的表达，从而抑制TGF－β2 的抗角膜内皮增殖的作用，促进角膜内皮细胞增生修复。 |
