目的 观察外源性全反式视黄酸对CRX基因表达下调的斑马鱼感光细胞外节段发育和视蛋白表达的作用。材料和方法 斑马鱼受精卵显微注射CRX-反义寡核苷酸(MOs),下调CRX基因的表达。在受精后48小时,一组胚胎培养液中加入1× 10-7Mol/L的全反式视黄酸溶液(CRX+RA组),一组加入相同浓度的全反式视黄酸溶剂-二甲基亚砜(CRX组)。另外一组为正常对照组。收集受精后72和96小时的标本,进行眼球组织切片、电镜和整体原位杂交。结果 1.光镜下,各组的视网膜组织切片观察没有明显差异。2.电镜下,对照组72hpf,感光细胞有外节盘形成,层状结构清晰; CRX组未发现明显的外节盘结构;CRX+RA组的感光细胞有许多外节盘形成,结构清晰,且外节盘的体积较大。3.受精后72小时,对照组的视网膜部位可观察到Rho、SWS1和SWS2三种视蛋白的表达;CRX组这三种视蛋白的表达明显减少;CRX+RA组三种视蛋白的表达比CRX组明显增加,基本达到对照组的水平。结论 全反式视黄酸能促进CRX基因表达下调的斑马鱼感光细胞外节段的形成和视蛋白的表达。 |