PTEN对电场中人视网膜色素上皮细胞移行及FAK信号传导通路的调控作用
韩静 闫小龙 惠延年 韩泉洪 朱洁 第四军医大学西京医院眼科,710032
目的:观察PTEN对电场诱导的人视网膜色素上皮(hRPE)细胞移行及局部黏着斑激酶(FAK)信号传导通路的影响。方法:PTEN转染hRPE细胞,将各组hRPE细胞置于电场强度为8V/cm的直流电场中暴露3h,显微摄像系统连续记录细胞每隔15min移行图像,图像分析系统处理结果。RT-PCR和Western blot方法检测细胞内目的基因及0h、0.5h、1h、3h各组细胞内FAK、pFAK的蛋白表达。结果:未转染及空载体质粒转染组细胞未受电场作用时随机分布。电场暴露后细胞胞体向垂直于场线方向伸长并向电场阴极方向移行,随电场暴露时间延长此定向移行更为明显。PTEN转染细胞暴露于电场前后细胞形态未见明显变化,电场暴露3h后细胞未见明显移行。Western blot检测结果显示电场作用后对照组细胞内FAK水平稳定,pFAK表达明显升高;PTEN转染组电场作用前后细胞内pFAK表达均不显著。结论:电场可诱导hRPE细胞的定向移行,该作用可能与FAK信号传导通路的激活有关。PTEN可能通过阻断FAK通路的激活而抑制hRPE细胞在电场中的移行。提示PTEN调控的FAK信号传导通路是调节电场中hRPE细胞移行的机制之一。 |