CpG DNA/TLR-9对人角膜内皮细胞急性免疫信号传递的影响
马忠旭1 山上 聪2 新家 真2
1:天津市眼科医院 天津市和平区甘肃路4号 300020 (2:东京大学附属病院眼科)
目的:研究Toll样受体家族中TLR9识别非甲基化CpG DNA对人角膜内皮细胞急性免疫信号传递的影响。
方法:培养人角膜内皮细胞并抽提细胞总RNA,用RT-PCR 法对人角膜内皮细胞中TLR1~ 10的mRNA 表达进行检测。用流式细胞仪检测细胞中TLR2、TLR3、TLR4和TLR9的表达。用RayBio人细胞因子抗体分析试剂盒对在5μM、15μM和25μM浓度human CpG DNA和Non CpG DNA作用下,人角膜内皮细胞表达各细胞因子的情况进行检测。
结果:RT-PCR显示全部Toll样受体家族1-10均可在人角膜内皮细胞表达。流式细胞仪检测显示在细胞表面,TLR2、TLR3、TLR 4和TLR 9的表达均为阴性,在穿透细胞后,细胞内部TLR 9的表达为阳性。而非甲基化human CpG DNA作用组相比Non CpG DNA对照组,IL-8、GRO、TIMP-1、TIMP-2的表达为阳性,后者为阴性。
结论:人角膜内皮细胞能表达全部Toll样受体, TLR9通过识别非甲基化CpG DNA在人角膜内皮细胞急性免疫信号传递及诱导抗感染免疫中发挥重要作用。 |