目的:为什么许多眼底疾病具有明显性别差异?近年研究发现雌激素受体除了分布于性器官外,在眼组织中也有明显分布,尤其是视网膜和葡萄膜,其作用除了一般生理作用外,还通过血管内皮生长因子调控新生血管生成、通过雌激素受体调控一氧化氮的基础释放以及降低炎症反应程度和缺血再灌注组织的损伤。新生血管生成是许多眼底疾病的常见和严重并发症,其发病机制还有待深入研究。本研究通过去势方法建立降低雌激素水平动物模型,用氪激光诱导光敏剂虎红方法,建立视网膜静脉阻塞模型,研究雌激素对视网膜新生血管生成的影响,为认识一些新生血管性眼底疾病提供理论依据。
方法:
1.选用健康成熟雌性SD大鼠,随机分为2组,1组用去势方法建立体内低雌激素水平动物模型,另1组用假去势方法作为对照组。
2.1周后用阴道上皮涂片方法验证模型的成功与否。
3.符合标准的SD大鼠尾静脉注射虎红,用氪激光诱导方法,建立视网膜静脉阻塞模型。
4.2周后用眼底荧光血管造影方法证实静脉阻塞模型成功与否,并初步判断假去势组和去势组荧光素渗漏的差异。
5.第2天SD大鼠血管内注射伊文思蓝,循环2小时后用生理盐水心脏灌注冲洗,排除视网膜血管内血液,用分光光度计测定视网膜内渗漏的伊文思蓝含量,定量分析假去势组和去势组视网膜新生血管的生成情况。
6.实验结果进行t检验分析。
结果:
1. 雌性SD大鼠去势和假去势手术顺利,1周后阴道上皮涂片证实去势大鼠雌激素水平下降明显(t=21.008,P=0.000),假去势大鼠雌激素水平改变不明显(t=0.319,P=0.756)。
2. 激光诱导视网膜静脉阻塞模型,激光后即可见黑色血栓形成,静脉回流停滞,周边视网膜散在小出血点。
3. 2周后眼底荧光血管造影证实假去势组和去势组均有视网膜新生血管生成及荧光素渗漏,但是假去势组的病变明显轻于去势组。
4. 荧光光度计测定假去势组伊文思蓝平均渗漏量为17.8300±4.26569ng/㎎,去势组为25.5030±4.37847ng/㎎。t检验分析示二者之间的差异有统计学意义(t=3.96936,P=0.001)。
结论:本实验结果表明在视网膜静脉阻塞的动物模型中,雌激素水平降低可增加视网膜新生血管的生成,提示体内雌激素水平降低与视网膜血管异常有关。同时提醒我们:在研究新生血管的动物实验中,雌激素水平差异是一个重要的混杂因素,在实验设计时应该予以注意。去势和假去势动物模型,造成动物体内雌激素水平差异明显,是研究雌激素对机体作用的可靠模型。
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