猪视网膜色素上皮细胞的体外培养与鉴定
李颖 黄琛
作者单位：北京市海淀区花园北路49号，北京大学第三医院眼科中心 100083
目的: 探索一种简单有效的体外分离猪视网膜色素上皮(RPE) 细胞的方法，为研究RPE细胞的功能及治疗有关眼底疾病提供细胞来源。
方法: 采用胰酶消化法分离猪RPE细胞, 10%DMEM培养液培养, 每天倒置显微镜下观察细胞生长情况, 用慢冻速融法对细胞进行冷冻和复苏，以免疫组织化学法鉴定培养细胞的来源和纯度。用流式细胞仪分析培养细胞的细胞周期。
结果: 用此法分离培养的细胞结构完整，收获量多，铺满汇合的时间缩短。离体培养细胞初期呈圆形, 富含黑色素, 12～24h贴壁呈圆形、梭形及不规则形。传代后细胞渐趋透明。免疫组化证实RPE细胞均为鼠抗人角蛋白染色阳性。细胞周期分析提示体外培养的RPE细胞保持正常的繁殖能力。细胞冻存复苏后的存活率高，与冻存前细胞相比未见明显异常.
结论: 此法简单可行有效，培养的细胞可作为体外猪RPE细胞的来源。
[关键词] 视网膜色素上皮细胞; 细胞培养; 猪
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