大鼠泪腺上皮细胞的体外培养与鉴定
姚小磊，王方，彭清华
湖南中医药大学，湖南 长沙 410007
目的：目前已经有人、兔两种哺乳类动物泪腺上皮体外培养的报道，但是未见大鼠泪腺上皮细胞体外培养在国内的公开报道。目前，针对于泪腺上皮细胞的研究越来越多，且多与干眼症有关，因此大鼠泪腺上皮细胞的体外培养将给予研究较方便的实验材料。本实验旨在探讨大鼠泪腺上皮细胞原代体外培养、鉴定、冻存和复苏的方法。
方法：应用混合消化液培养法对Wister和SD两种大鼠泪腺上皮细胞进行体外原代培养，应用免疫组织化学染色方法对培养有第2代上皮细胞进行Pankeratin蛋白染色，以进行鉴定，取第2、4代细胞进行冻存，1个月后取出复苏。
结果：单纯胰酶消化较难使细胞贴壁，因此多聚赖氨酸包被培养瓶是比较重要的一步，多聚赖氨酸包被后，混合消化液培养法可获得较纯的泪腺上皮细胞，所获取的泪腺上皮为贴壁生长，未能形成生理状态下泪腺的囊腔结构，培养的泪腺上皮免疫组化染色Pan-keratin蛋白染色阳性。经冻存和复苏，细胞保持良好活性。
结论：混合消化液培养法联合多聚赖氨酸包被可获得较纯的泪腺上皮细胞，但不能保持其泪腺束腔结构。
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