| Bcl2联合BDNF基因治疗视网膜神经节细胞变性的研究 樊嘉雯 莫晓芬 徐格致 复旦大学附属眼耳鼻喉科医院 上海市200032目的:探讨玻璃体腔联合注射目的基因Bcl2和脑源性神经营养因子（BDNF）的方法对成年SD大鼠视神经横断伤后视网膜神经节细胞的保护作用。方法:双侧上丘核团注射DiI逆行标染视网膜神经节细胞。将标记后的大鼠随机分为Bcl2组、BDNF组、Bcl-2联合BDNF组三组治疗组，以及空质粒组、实验对照组、正常对照组三组对照组。按分组情况玻璃体腔注射质粒，通过活体电穿孔辅助质粒转染入大鼠节细胞，标记后7d手术切断实验组大鼠眶内段视神经，切断术后7d，14d及28d取眼球，视网膜铺片后荧光显微镜观察目的基因偶联的GFP绿色荧光表达情况，观察并计数存活的节细胞。TUNEL法标记凋亡的节细胞。结果:活体电穿孔辅助质粒转染的各组(n=6）在各时点均能观察到GFP表达。治疗组在视神经切断后7d，14d及28d的节细胞生存率明显高于对照组,而联合组高于Bcl2组、BDNF组，并具有统计学意义。联合组在损伤后期（14d-28d）疗效稳定。损伤早期(7d)联合组TUNEL阳性细胞数明显低于其他各组。结论:Bcl2和BDNF单基因治疗方法对保护损伤后凋亡的视网膜神经节细胞有效，而联合应用Bcl2和BDNF的基因治疗方法，在损伤早期有更显著的治疗效果，且在损伤后期疗效稳定。 |
