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| In-vitro Induction and Differentiation of Embryonic Rabbit Retina and Brain Neural Stem Cells |
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| 作者：吴婵 文章来源：北京市东城区帅府园1号协和医院眼科 点击数997 更新时间：2008/1/14 文章录入：毛进 责任编辑：毛进 |
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体外培养及诱导胚兔视网膜及脑神经干细胞分化的研究
吴婵 陈连凤 许卓再 董方田
北京市东城区帅府园1号北京协和医院眼科，100730
摘要 目的：分离、培养和鉴定胚兔视网膜及脑NSCs细胞，体外诱导NSCs向视网膜神经上皮细胞分化，并对不同培养条件及诱导条件进行比较。方法：取胚兔视网膜及大脑皮质制备单细胞悬液，分别在5种不同培养基中进行体外培养并纯化。选取无血清条件下传三代的NSCs，分别在两种培养基中诱导8-10天。采用免疫荧光法及流式细胞仪检测不同培养条件及诱导条件下获得的细胞对神经干细胞和视网膜神经上皮细胞抗原的表达。结果：无血清培养基添加N2、EGF、bFGF、LIF四种因子组可以获得最佳纯化效果。经5%FBS诱导的细胞表达Rodopsin较联合应用ATRA时高，但表达Thy1.1低于后者。结论：悬浮筛选法可成功分离和培养高纯度的神经干细胞。无血清培养基添加N2、EGF、bFGF、LIF四种因子可以获得最佳纯化效果。经5%FBS诱导的细胞表达视杆细胞表面抗原高于联合应用ATRA者，但表达神经节细胞表面抗原低于后者。本实验初步确定了最佳的NSCs体外培养体系及诱导体系，为进一步进行NSCs的体内移植研究及视网膜变性疾病的治疗奠定了基础。 |
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