题目:口服DNA疫苗防治实验性脉络膜血管新生
作者:张含 刘哲丽
单位:110001 辽宁省沈阳市中国医科大学第一临床学院眼科
目的:考察一种口服抗血管新生DNA疫苗对实验性CNV的防治效果,并对其作用机制进行探讨,为抗血管新生DNA疫苗在眼科领域的应用提供线索和依据。
方法:利用电转化的方法将携带小鼠Flk-1基因的重组质粒导入减毒的沙门氏菌制成DNA疫苗,经口免疫小鼠。以激光击穿Bruch膜诱导CNV动物模型,10天后采用脉络膜铺片和病理学检查方法定量分析此疫苗对于实验性CNV的防治效果,同时利用免疫组化方法考察CNV中Flk-1的表达情况。为探讨细胞毒性T细胞途径和抗体途径在本DNA疫苗抗血管新生过程中的贡献,分别在体消除CD8+和CD4+T细胞,分析对DNA疫苗疗效的影响;并应用双重免疫荧光染色法探讨疫苗免疫后CD8+T细胞和CNV血管内皮细胞的关系。
结果:DNA疫苗免疫组实验性CNV的面积和厚度都明显小于对照组,Flk-1表达减低。去除CD8+T细胞明显降低了DNA疫苗的抗血管新生作用,而去除CD4+T细胞则没有影响。双重免疫荧光染色揭示大量CD8+T细胞聚集于免疫组的实验性CNV血管内皮处。
结论:DNA疫苗明显抑制了实验性CNV的发展与Flk-1的表达,这种抗血管新生作用是通过激活细胞毒性T细胞来实现的。 |