7-甲基黄嘌呤对人巩膜成纤维细胞影响的研究
崔冬梅 葛坚 Klaus Trier
目的：腺苷受体非特异性抑制剂7-甲基黄嘌呤（7-MX）能抑制近视的发展，本研究旨在探讨腺苷受体各亚型在人巩膜成纤维细胞（HSF）的表达和分布及7-MX对HSF的作用及机制。
方法：原代培养HSF并鉴定。荧光免疫化学方法检测腺苷受体各亚型在体外培养的HSF及人巩膜组织的表达和分布。免疫印迹方法进一步验证腺苷受体各亚型的表达。取第三代细胞用不同浓度7-MX培养不同时间，MTT方法检测其细胞增殖率，双向电泳方法检测其蛋白组表达差异；免疫印迹方法检测腺苷受体各亚型的表达变化。
结果：腺苷受体各亚型在体外培养的HSF及人巩膜组织中均有表达，但其分布不同：腺苷受体A1主要集中在细胞核和核膜；A2A主要分布在细胞核一侧的胞浆中；A2B均匀分布在细胞核和胞浆中；A3在胞浆中微弱表达。用7-MX培养HSF后，随着浓度的增高及时间的延长，HSF的增殖率有所增加，未见凋亡。双向电泳结果分析显示，对照组和7－MX组之间蛋白质表达存在明显的差异。免疫印迹结果显示，和对照组相比，7－MX可明显抑制腺苷受体亚型A1、A2B的蛋白表达（p＜0.05），而A2A、A3的蛋白表达差异无统计学意义。
结论：腺苷受体各亚型在HSF中均表达，7－MX通过抑制HSF 腺苷受体的表达，来调控HSF对细胞外基质的分泌。
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