题目：豚鼠形觉剥夺性近视眼组织中M受体五种亚型表达的变化
作者：刘琼1，曾骏文2，于健1， 吴捷2
作者单位：1 广州南方医科大学南方医院眼科 广州大道北1838号 510515
2 广州中山大学中山眼科中心 广州先烈南路 5 10060
目的：探讨豚鼠形觉剥夺性近视眼视网膜、脉络膜、巩膜和虹膜－睫状体组织中， M受体五种亚型的表达变化。
方法： 1～2周龄的三色豚鼠36只，随机分为形觉剥夺性近视眼组（FDM）(n＝21只)和正常组（N）(n＝15只)。FDM组豚鼠随机给予一眼戴磨砂镜片，另一眼开放作为自身对照组（FC）(n＝21只)。21天后测量三组动物眼屈光度和眼轴长度。提取各组眼视网膜、脉络膜、巩膜和虹膜－睫状体组织总RNA和蛋白质，半定量RT-PCR和Western blotting检测M受体五种亚型的表达变化。
结果：
1.形觉剥夺21天后，FDM组与FC组和N组的屈光度和眼轴之间的差异有显著性意义(p< 0.05)：FDM组与FC组和N组相比较，产生相对近视-4.28 ± 1.70 D (p < 0.001)，眼轴相对增长0.27 ± 0.17 mm (p< 0.05)。
2.半定量RT-PCR结果显示：以目的基因与GAPDH内对照光密度比值作为定量标准，结果显示：FDM组与N组和FC组相比较，M1～M5亚型mRNA 在视网膜、脉络膜和虹膜－睫状体组织的表达无显著性差异（p>0.05）；在后极部巩膜组织中，FDM组与FC组和N组相比较，M1和M4亚型的表达有显著性增加（p<0.05），而M2、M3和M5亚型的表达无显著性差异（p>0.05），其中FDM组中M1亚型的表达增加了＋18.67%，M4亚型增加了＋26.48%（p<0.01）。
3.Western blotting 结果显示：以目的蛋白与GAPDH蛋白条带的光密度比值作为定量标准，结果显示：FDM组与FC组和正常组相比较，M1～M5亚型蛋白表达在视网膜、脉络膜和虹膜－睫状体组织无显著性差异（p>0.05）；在后极部巩膜组织中，FDM组与FC组和N组相比较，M1和M4亚型蛋白表达在显著性增加（p<0.05），而M2、M3和M5亚型的表达无显著性差异（p>0.05），其中FDM组中M1亚型蛋白表达增加了＋24.65%，M4亚型蛋白增加了＋49.11% (p<0.01)。
结论：在豚鼠FDM的形成中，后极部巩膜组织的M1和M4受体的表达显著性增加，提示在近视眼发生和发展中，巩膜组织的M受体可能参与调控眼球的生长。
关键词：近视，RT-PCR，Westernblotting，豚鼠
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