| 目的：观察体外培养的兔眼虹膜色素上皮细胞(iris pigment epithelium,IPE)的生长状况,为进一步研究及移植IPE细胞提供实验基础。
方法：采用酶消化加显微分离法,分离IPE细胞,对其进行培养、传代、冻存和复苏。用透射电镜、细胞免疫化学法鉴定细胞性质。
结果： 刚分离出来的原代虹膜色素上皮细胞(IPE)呈黑色圆球形，大多数细胞成单细胞状态，有的呈2-3个细胞的细胞团。经3-5日开始贴壁，此期可见圆球形贴壁细胞与半贴壁细胞和悬浮细胞共存于培养瓶中。细胞进一步延展，形成纺棰状或三角形，黑色素颗粒聚集于核周围，胞体可伸出类似伪足样的结构，向周围进一步扩展。约 5.25±1.74天后，大约 70%的IPE 细胞开始出现分裂增殖，在镜下，有的表现为胞体增大，细胞内出现双核，有时可见分裂相，而更多细胞则仅表现为色素颗粒的减少。传代后的细胞起初呈片状延展相互接触后，延长成纺棰形或多角形。复苏后的IPE细胞呈圆球状，散在均匀分布于培养液中，约1-3日贴壁开始生长,倒置显微镜下，细胞的形态与冻存前无差异；复苏后的细胞生长良好，并可进行传代培养。
结论：本课题在体外应用细胞培养技术，成功地培养了虹膜色素上皮（IPE）细胞 并传代培养3月余，经免疫组织化学染色证实，所培养细胞为纯IPE 细胞；同时对所培养细胞进行冻存及复苏，复苏后的细胞亦生长良好。 |
