目的:观察并比较不同浓度aFGF、MaFGF对培养大鼠RGCs存活与生长的影响并比较aFGF的神经保护活性对促有丝分裂活性的依赖程度。
方法:(1)Thy-1单克隆抗体鉴定、免疫阳性细胞计数、计算轴突生长细胞百分率;(2)对照组(DMEM培养液);25、100、400ng/mLaFGF组(A1组、A2组、A3组)和25、100、400ng/mLMaFGF组(B1组、B2组、B3组),记录RGCs存活时间;(3)将培养3、5、7d的RGCs通过MTT法测量吸光度(A)值。
结果:(1)培养第3d,大部分存活细胞为Thy-1单克隆抗体反应阳性,5、7d后阳性细胞数逐渐减少。第3d,免疫阳性细胞数及有轴突生长的细胞比率均无明显差异;第5、7d差异均有统计学意义;(2)各实验组和对照组细胞大小及形状均无明显差别;(3)第3d,A、B各浓度组A值与对照组比较均无显著性差异,培养第5、7d,差异均有统计学意义;相同培养天数,A2比A1、A3较高,差异均有统计学意义;A1组与A3组比较,无显著性差异;相同浓度的aFGF各组与MaFGF各组比较,在相同天数视差异均无统计学意义。
结论:(1)aFGF、MaFGF均能促进培养大鼠RGCs的存活,并能延长RGCs的存活时间,且对RGCs的大小、形态无影响;(2)aFGF保护及促进RGCs存活的作用不依赖其有丝分裂活性。 |