抑制消减杂交技术筛选骨髓间充质干细胞诱导分化前后差异表达基因
牟大鹏 ,苏冠方,徐春玲
[摘要]
目的:筛选和克隆视网膜神经节样细胞与骨髓间充质干细胞的差异表达基因。方法：提取视网膜神经节样细胞总RNA为检测子,骨髓间充质干细胞的总RNA为驱动子。进而由抑制消减杂交方法获得消减杂交产物。结果：本消减文库共挑取克隆120个，经PCR鉴定，其中含有插入片段的阳性克隆有20个。在这些阳性克隆中，PCR扩增片段大小分布于150bp~1000bp的范围内，主要集中于200bp~800bp之间。根据对6个已知基因的了解，这些差异表达基因与信号传导、Ca2+离子运输以及轴突生成等功能有关。结论:抑制消减杂交技术有效地克隆了骨髓间充质干细胞诱导前后差异表达的基因，为阐明骨髓间充质干细胞分化为视网膜神经节样细胞分子机制提供了有用的的信息。
关键词：骨髓间充质干细胞，抑制消减杂交，差异表达基因。
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