胆碱能信号对人视网膜色素上皮细胞自分泌功能的调控
谭佳 刘双珍
中南大学湘雅医院眼科（湖南长沙，410008）
目的：研究表明TGF-β2与近视眼巩膜重塑密切相关，本研究通过观察卡巴胆碱干预下人视网膜色素上皮细胞系（D407）表达及分泌TGF-β2的时效和量效关系，研究其对人视网膜色素上皮细胞自分泌功能的调控，旨在阐明胆碱能神经递质调控近视眼巩膜重塑的可能机理。
方法：常规培养D407细胞，药物干预前换用无血清培养基培养24小时。分别做如下处理：（1）实验组：加入胆碱能激动剂卡巴胆碱（10-8～10-4mol/L）；（2）空白组：不加药物。于处理后2、4、8、16、24、48小时分别采用ELISA、RT-PCR、Western blot法检测细胞上清液及胞浆中TGF-β2 的表达水平，分析时效与量效关系。统计学方法采用重复测量的方差分析。
结果：实验组细胞上清液中TGF-β2含量，胞浆中TGF-β2 mRNA和蛋白质的表达水平均较空白组增加，随卡巴胆碱浓度的增高及作用时间的延长该效应逐渐明显，具有统计学意义；浓度与作用时间无交互作用。
结论：卡巴胆碱可促进视网膜色素上皮合成及分泌TGF-β2，提示胆碱能神经递质可通过此途径调控近视眼巩膜细胞外基质重塑。 |
