Toll样受体2和4介导烟曲霉菌诱导的人角膜上皮细胞炎性细胞因子表达
郭慧 吴欣怡 (通讯作者:吴欣怡,Email:xywu8868@163.com)
通讯地址:山东大学齐鲁医院眼科,山东省济南市文化西路107号,250012。
目的:研究RNA干扰人角膜上皮细胞TLR2和TLR4表达对烟曲霉菌诱导的炎性细胞因子表达的影响。
方法:设计TLR2和TLR4特异性siRNA序列并构建表达载体。分别转染永生化人角膜上皮细胞,利用RT-PCR及Western blot检测TLR2和TLR4表达。制备烟曲霉菌菌丝和上清抗原分别刺激转染siRNA的角膜上皮细胞及未转染细胞,于30min,1h,2h,4h,8h收取上清利用ELISA检测IL-1β和IL-6的表达。
结果:TLR2或TLR4-siRNA质粒转染角膜上皮细胞后,TLR2 和TLR4 表达均明显被抑制。使用烟曲霉菌丝及上清抗原刺激后,对照组IL-1β及IL-6表达明显上调;RNA干扰TLR2或TLR4表达均显著抑制IL-1β及IL-6分泌。
结论:TLR2和TLR4是角膜上皮细胞识别烟曲霉菌的重要受体并介导炎性细胞因子的表达,干扰TLR2和TLR4表达能显著抑制角膜上皮细胞炎性因子的产生。
关键词:Toll样受体,RNA干扰,炎性细胞因子。
注:国家自然科学基金项目(30571997)资助课题
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