N-糖基化修饰参与高糖环境下视网膜微血管内皮细胞ICAM-1膜表达上调
刘堃 刘海芸 江建海** 叶纹* 许迅 上海市第一人民医院（200080）；复旦大学附属华山医院*（200040）；复旦大学基因中心**（200032）
目的：探讨高糖环境下，酶促糖基化产物—N-糖基化修饰与牛视网膜微血管内皮细胞（BREC）膜表面细胞间黏附分子－1（ICAM-1）表达的关系。方法：含不同浓度葡萄糖（5 mM、10 mM、20 mM、30 mM）的DMEM培养基培养BREC，采用衣霉素（tunicamycin）干扰细胞N-糖基化修饰。RT-PCR和Western blot分别检测细胞内ICAM-1分子在mRNA和蛋白水平上的表达，流式细胞仪观察细胞膜表面ICAM-1分子的表达情况；免疫共沉淀结合凝集素染色的方法分析高糖培养后ICAM-1分子N-糖基化修饰的变化。结果：高糖培养上调ICAM-1分子在mRNA、蛋白水平以及细胞膜表面的表达，且ICAM-1表达的 上调与ICAM-1分子的N-糖基化水平改变一致；抑制细胞的N-糖基化修饰可抑制高糖所诱导的BREC膜表面ICAM-1分子表达的上调。结论： 高糖培养下，BRCE膜表面ICAM-1分子表达上调与N-糖基化修饰相关，抑制糖基化修饰可能成为治疗糖网病的新靶点。
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