[1]题目:两种方法纯化胎鼠脑室管膜下区神经干细胞的结果比较[2]作者:原慧萍,周雪美,周欣荣,曲巍,李鸿翼,邵正波[3]单位.城市:哈尔滨医科大学附属第二医院眼科 150086[4]目的:体外分离培养胎鼠脑室管膜下区神经干细胞,利用有限稀释法和连续传代法纯化神经干细胞,并对两种方法纯化后的细胞纯度及增殖能力进行比较.[5]方法:机械分离胚胎14.5天的胎鼠脑室管膜下区细胞,采用无血清培养基进行体外培养。利用有限稀释法和连续传代法纯化神经干细胞,通过免疫细胞化学法鉴定两种方法纯化后神经干细胞的纯度(Nestin阳性率)及分化细胞的类型。将两种方法纯化后的第3代神经干细胞以相同的密度分别接种到24孔板中,连续培养6周,每周进行细胞计数,绘制生长曲线。[6]结果:有限稀释法和连续传代法纯化的神经干细胞Nestin阳性率均高于原代神经干细胞(31±0.02%),有限稀释法的Nestin阳性率(91±0.03%)高于连续传代法(58.8±0.02%)(p<0.05)。有限稀释法纯化神经干细胞的生长曲线一直处于增殖趋势,而连续传代法的细胞前3周是上升趋势,以后趋于平缓(p<0.05)。[7]结论:体外成功地培养了胎鼠脑室管膜下区神经干细胞,证实有限稀释法能有效地纯化神经干细胞,并保持了细胞良好的增殖能力及多向分化潜能,为基因治疗视神经损伤疾病提供了大量的种子细胞。
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