未折叠蛋白应答在晶体上皮细胞凋亡中作用的研究 蔡可丽 杨雪莉 山东大学齐鲁医院 济南文化西路47号 250012
目的 探讨内质网应激中未折叠蛋白应答在晶状体上皮细胞凋亡中的作用及其与白内障发病机制的关系。方法 将hLECs分为对照组和实验组A、B、C、D组,分别用0、1、2、5、10mmol/L的同型半胱氨酸(Hcy)作用细胞24小时,MTT法检测细胞增殖抑制率;Hoechst33258荧光染色检测细胞凋亡率;活性氧荧光探针DCFH-DA检测刺激后细胞中活性氧产物(ROS);GSH检测试剂盒检测刺激后细胞中还原型谷胱甘(GSH)的含量;Western blot技术检测刺激后细胞中的GRP78,caspase-12的表达。结果 不同浓度的Hcy刺激晶体上皮细胞后,细胞活力呈浓度依赖性下降,其中C、D组可使细胞活性下降48.3%,57.7%,与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.01),并且能诱导细胞的明显凋亡;细胞中ROS水平呈浓度依赖性升高,GSH减少,C、D组与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05);Western bolt技术检测显示刺激后细胞中GRP78,caspase-12表达升高,C、D组与对照组相比,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 高浓度的内质网刺激因子可刺激晶体上皮细胞产生内质网应激,并通过未折叠蛋白反应导致晶体上皮细胞凋亡,产生白内障。
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