Cre/LoxP增强自杀基因系统对晶状体上皮细胞特异性杀伤作用的实验研究
蒋永祥、卢奕、杨晋
复旦大学附属眼耳鼻喉医院眼科200031 上海市汾阳路83号
[摘 要]目的 探讨Cre/loxP系统能否增强人晶状体上皮细胞（HLEC）特异性启动子LEP503调控的自杀基因系统高效靶向抑制HLEC增殖作用。方法 构建Cre/loxP增强型慢病毒介导HLEC特异性启动子LEP503调控的HSV-tk系统即Cre/LoxP增强型表达载体组合（包括调控载体Lenti-lep503-HSVtk-cre和靶载体Lenti-hPGK-loxp-EGFP-loxp-HSVtk）。以HLEC，Hela，RPE为研究细胞分别转入广谱表达载体,特异性表达载体和增强型特异性表达载体组合，观察不同细胞组荧光强度，判断其组织特异性表达情况。不同浓度GCV作用后，利用CCK-8、流式细胞仪等检查，判断细胞杀伤作用。结果 增强型特异性启动子在Hela，RPE细胞中表达EGFP，在HLEC中不表达EGFP。20ug/ml GCV对细胞有明显的杀伤作用，流式细胞仪检测，增强型特异性表达载体组合共感染细胞凋亡为75.65%。 结论 Cre/loxP增强型表达载体组合在HLEC中的特异表达；GCV作用下能高效靶向抑制HLEC增殖。
关键词 Cre/LoxP 系统；自杀基因；晶状体上皮细胞
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