Nogo-66 蛋白的免疫原性研究
岳红云 贺翔鸽 谢琳
第三军医大学大坪医院野战外科研究所眼科 重庆，400042
摘要：目的：通过实验室研究证实，以Nogo基因cDNA为模板表达合成Nogo－66蛋白具有明确的免疫原性，为通过免疫治疗进行受损中枢神经保护提供初步依据；方法：以质粒原核表达和纯化后的Nogo-66蛋白粉剂无菌纯水稀释为0.1ug/ul, 选择8周龄Sprague Dawley （SD）大鼠，100ug/次、1次/7d进行免疫，无菌纯水等量相同频度进行对照；免疫后选择5d、7d、10d、14d、20d、28d、36d、48d不同时间段采集血清，酶联免疫吸附测定方法检测免疫前后实验动物的血清IgG滴度；分别于初次免疫后4d、8d、16d、20d无菌分离实验动物脾淋巴细胞，淋巴细胞分层液纯化脾脏T淋巴细胞后，流式细胞术检测分析细胞活化增殖情况，与对照组进行对比。结果：实验组动物于初次免疫后16～28d， IgG滴度比对照组提高（P<0.05）；免疫后5～15d的T细胞增殖能力明显提高，与对照组相比有显著性差异（P<0.05）。实验组动物无试验性免疫反应性脑脊髓膜炎发生。结论：通过Nogo－66蛋白进行动物接种免疫，能够同时提高接种动物的细胞免疫及体液免疫水平，在体实验证实Nogo－66蛋白免疫原性明确。可用于通过免疫治疗达到神经保护作用的进一步研究。 |
