目的:通过体外实验,测定维甲酸、三氟拉嗪、槲皮素三药的IC25、IC50,观察其两两组合后对体外传代培养的兔RPE细胞增殖的抑制作用及安全性,筛选出抑制效果好、毒副作用低的药物组合方案。
方法:
1.用胰酶消化法分离培养成年有色兔RPE细胞并传代。
2.应用噻唑兰比色法(MTT),检测不同浓度范围各受试药作用于RPE细胞120小时后的细胞增殖抑制率。
3.根据量效关系方程分别求得三药的25%抑制率浓度(IC25)、50%抑制率浓度(IC50)。
4.测定各药IC25、IC50两两组合后作用于细胞120小时后的细胞增殖抑制率。
5.利用台盼兰染色活细胞计数法、光镜、透射电镜评价药物的细胞毒性。
结果:
1.维甲酸IC50与槲皮素IC50联合组、三氟拉嗪IC50与槲皮素IC50联合组在给药后72小时细胞全部死亡。
2.维甲酸IC50与三氟拉嗪IC50联合组、三氟拉嗪IC25与槲皮素IC50联合组给药后120小时透射电镜观察显示细胞严重变性坏死。
3.维甲酸IC50与槲皮素IC25联合组给药后120小时细胞增殖抑制率与单独应用维甲酸IC50时相比较无显著差别(P=0.413)。
4.维甲酸IC50与三氟拉嗪IC25联合组给药后120小时抑制率(%)为80.3855±0.5693(P<0.01),细胞活力(%)为97.58±8.33,光、电镜观察,受试细胞无异常表现。
5.三氟拉嗪IC50与槲皮素IC25联合组给药后120小时抑制率(%)为79.50±0.9985(P<0.01),细胞活力(%)为97.58±5.00,光、电镜观察,受试细胞无异常改变。
结论:
1.维甲酸IC50与三氟拉嗪IC25联合组、三氟拉嗪IC50与槲皮素IC25联合组可安全而比单药更有效地抑制体外RPE细胞的增殖;
2.将几种药物联合应用,可降低单药浓度,又可提高药物效果,并未出现明显毒副作用,可能成为一种有价值的防治PVR的用药方式。
作 者:王萌 河北医科大学第二医院眼科 050000医师
单位地址:河北省石家庄市和平西路河北医科大学第二医院
邮 编:
wangmeng200152@sohu.com |