| 补体C5b-9复合物对人RPE细胞膜通透性及钙离子通道的影响 天津市眼科医院(300020) 陈松 李文博 马修彬 钱江源 目的:探讨补体系统激活终末产物C5b-9复合物对人视网膜色素上皮(RPE)细胞膜通透性及钙离子通道的影响，明确补体系统激活对RPE细胞生理性内环境影响。方法: 采用大鼠血清接触兔红细胞提取补体C5b-9复合物，提纯、鉴定。体外培养的人RPE细胞分别暴露于0μg/ml、1μg/ml、10μg/m、20μg/ml、40μg/ml和80μg/ml的补体C5b-9复合物，光学显微镜及电子显微镜观察膜通透性改变。确定C5b-9复合物的亚溶破剂量，作用人RPE细胞，采用激光共聚焦显微镜动态观测细胞内钙离子变化。结果:1、10、20μg/ml C5b-9复合物作用24小时，细胞形态无明显改变。40μg/ml组，细胞边界模糊，部分结构消失，培养液内可见大量黑色素颗粒。80μg/ml 组，仅见极少量完整RPE细胞，培养液混浊，充满黑色素颗粒。20μg/ml为C5b-9复合物作用人RPE细胞的亚溶破量，电子显微镜下可见到有色素颗粒从RPE细胞内释出。激光共聚焦显微镜发现亚溶破C5b-9刺激后细胞内钙荧光强度迅速增强。之后逐渐下降， 5min后绝大部分Ca2+已恢复至静息水平。结论:补体C5b-9复合物浓度增加，可能是多种视网膜疾病的发病基础。 |
