人巩膜成纤维细胞中一氧化氮合酶表达及哌伦西平对一氧化氮合酶活性的影响
吴捷*,秦莉*,张林*,杨晓**,曾骏文**
*西安交通大学医学院第一附属医院 陕西省西安市雁塔西路277号 710061
**广州中山眼科中心 广州市先烈南路54号 510080
目的:研究人巩膜成纤维细胞中一氧化氮合酶亚型的表达,并了解哌伦西平对细胞生长及一氧化氮合酶活性的影响
方法:从眼库取捐赠眼球巩膜进行原代培养,用培养出来的第二代细胞进行角蛋白,平滑肌肌动蛋白,S-100,波形蛋白鉴定和一氧化氮合酶亚型检测.用MTT法检测哌伦西平和SNP对巩膜细胞生长的影响.用比色法研究哌伦西平对巩膜细胞一氧化氮合酶活性的影响
结果:人巩膜成纤维细胞角蛋白,平滑肌肌动蛋白,S-100表达阴性,波形蛋白表达阳性,三种一氧化氮合酶亚型在细胞中均有表达.哌伦西平对细胞生长的抑制呈剂量依赖效应,40uM-160uM SNP孵育8小时可明显抑制巩膜细胞生长.1.6mM哌伦西平可升高细胞的总一氧化氮合酶活性,而0.4mM,0.8mM和1.6mM哌伦西平可明显升高细胞诱导型一氧化氮合酶活性
结论:人巩膜成纤维细胞三种一氧化氮合酶亚型均有表达,哌伦西平可抑制巩膜细胞生长并刺激其一氧化氮合酶活性增高,一氧化氮供体SNP也可抑制细胞生长,哌伦西平抑制细胞生长的作用可能是通过一氧化氮信号通路来介导的 |
