不同应激对人视网膜色素上皮细胞增殖及grp78表达的影响
吴雅臻 李曼丽
吉林大学第二医院眼科 长春市自强街218号 130041
目的 探讨不同应激处理下人视网膜色素上皮细胞凋亡、增殖及grp78表达的特点,为研究RPE细胞对不同应激的反应机制提供依据。
方法 体外培养人RPE细胞,接种于96孔培养板行量-效关系分组:不同浓度C0Cl2组4组作用24h;不同浓度H2O2组4组作用24h;并设立对照组。RPE细胞接种于24孔培养板行时-效关系分组:在C0Cl2浓度为200μmol/L、H2O2终浓度为400μmol/L的基础上,分别选取作用后24h、48h、72h 3个时间点进行观测。采用MTT法检测细胞增殖情况,免疫细胞化学的方法检测grp78表达情况。
结果MTT测定结果显示,C0Cl2处理各组细胞活性均下降,而且RPE细胞的凋亡率与C0Cl2诱导浓度呈正相关。H2O2的浓度为200μmol/L时,MTT值与空白对照组之间无显著差异,而当H2O2的浓度升至400μmol/L和600μmol/L时,MTT值明显下降;C0Cl2、H2O2均可诱导人RPE细胞grp78的表达变化,有一定的时间依赖性。
结论:C0Cl2诱发缺氧模型、H2O2诱发氧化应激均可诱导人RPE细胞grp78的表达变化,与细胞凋亡有一定依赖关系。
|