Copine1在POAG小梁网细胞膜中的差异表达及钙离子依赖特性
中山大学中山眼科中心 眼科学国家重点实验室(510060)
张跃红 葛坚 高前应 何媛 孙雪荣 段永恒 江儒章
目的：筛选原发性开角型青光眼（POAG）病人小梁网细胞(TM)膜差异表达蛋白，并通过膜差异蛋白copine1的表达水平和转位活性探讨其在POAG发病机制中的可能作用。
方法：提取POAG病人和正常人TM细胞膜蛋白进行双向凝胶电泳，并通过质谱分析鉴定膜差异表达蛋白。在基因和蛋白水平验证copine1的表达；蛋白质印迹鉴定copine1在胞浆和胞膜部分的表达差异；钙离子载体A23187使小梁网细胞处于高钙状态后copine1从胞浆到胞膜的转位情况。
结果：筛选出copine1为膜差异表达蛋白之一。Copine1在POAG TM细胞中基因和蛋白表达均明显增高。细胞分布试验证实在正常人TM细胞中copine1只分布在胞浆，而在POAG TM细胞中copine1主要分布在胞膜。钙离子运载体A23187可使POAG TM细胞中copine1完全转位于胞膜，而正常人无明显转位。
结论：copine1在POAG病人TM细胞膜中表达明显上调，细胞内钙离子浓度增高还可以激活POAG病人TM细胞中copine1的膜转位。这提示TM细胞膜中高表达的copine1可能以钙离子依赖的机制参与了POAG的发病。 |
