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慢病毒介导的sflt-1基因对视网膜新生血管的阻遏作用
作者:吴强  文章来源:上海交通大学附属第六人民医院,上海市宜山路600号  点击数1458  更新时间:2008/1/15  文章录入:毛进  责任编辑:毛进
吴强 张敏 宋蓓雯 陆斌 胡萍 江丹
目的:探究可溶性血管内皮生长因子受体-1(sflt-1)基因片段对小鼠视网膜新生血管的阻遏作用。
方法:构建携带sflt-1基因第2~3免疫球蛋白样结构区域的重组慢病毒表达质粒。建立氧诱导的小鼠视网膜新生血管模型,将生后第7天的C57小鼠置于75%氧浓度环境,生后第12天返回正常空气中于玻璃体内注射慢病毒介导的sflt-1(2-3)基因片段,生后第17天处死,通过小鼠视网膜切片HE染色和心脏荧光素灌注视网膜铺片观察其对小鼠视网膜新生血管的阻遏作用,并通过Western Blot和免疫组织化学的方法检测该基因片段对视网膜血管内皮生长因子(VEGF)和VEGF受体-2(KDR/Flk-1)表达的影响。
结果:视网膜切片HE染色和荧光素灌注视网膜铺片均观察到小鼠视网膜新生血管显著减少。通过Western Blot和免疫组织化学的方法检测到视网膜VEGF表达略有下降,但不明显,视网膜神经节细胞层和内核层VEGF的表达无明显改变;而视网膜KDR的表达下降较显著,视网膜神经节细胞层和内核层表达均下降。
结论:慢病毒介导的sflt-1(2-3)基因转移能够明显阻碍小鼠视网膜VEGF的结合从而抑制视网膜新生血管的产生。
关键词:视网膜新生血管;sflt-1;慢病毒;小鼠;基因转移
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